Ghrelin对绵羊早期胚胎发育影响的研究

【摘要】Ghrelinisabrain-gutpeptidecontaining28aminoacidresidueswhichwasfoundinthegastrictissueofratbyaJapanesescientistKojimawiththemethodofimmunohistochemistryin1999.ItistheendogenicligandofGrowthhormonesecretagoguereceptor(GHS-R).Recently,moreandmoreevidenceshowsGhrelinhassignificantadjustfunctionforthereproductiveactivityofmammalanimalswiththediscoveriesofGhrelinintheuterus,fallopiantube,cervix,reproductivetract,oocytesandearlyembryosofmammalanimals,andwiththeindepthstudyofrelativemechanicalofGhrelin.StudyfoundGhrelinhassignificantfunctionforthedevelopmentofembryothoughthereisonlyafewreportsabouttheeffectsofGhrelinontheembryodevelopmenttonow.InordertoinvestigatetherelationshipbetweenGhrelinandthedevelopmentofearlyovineembryo,theearlyovineembryowereculturedin4kindsofembryodevelopmentalsolutionaddingGhrelin,addingD-Lys3-GHRP-6,addingbothGhrelinandD-Lys3-GHRP-6,controlgroup,13concentrationgradientgroups.Theembryodevelopmentsituationwereobserved,theembryocleavageratewerestatisticed.ItisfoundthatexogenousGhrelinaddinghasnosignificantauxo-actionforembryodevelopment.ButaddingD-Lys3-GHRP-6,blocktheGhrelinreceptor,thecleavagerateofthe4-cells^8-cellsembryowilldecreasesignificantlyby.AnditisreleasedthatthedoseofendogenousGhrelinisenoughforembryodevelopmentattheearlystageofovineembryo.Baseontheresults,thesignalpathwayMAPKisintroducedtoinvestigatethepossiblefunctionmechanicalofGhrelinonthedevelopmentofearlyovineembryo,TherelativeexpressionofkeyadjustproteinERK1,ERK2andP90rskofMAPKweretestedintheblocked2-cells,4-cells,8-cellsand16-cellsembryosbyQ-PCR.Andthe2scalegenesBcl-2andBaxwhichareusedtoevaluatethehappeningofcellapoptosisweretested,too.Wegetthefollowingconclusions:GhrelincanpromotethemRNAexpressionoftheERK1,ERK2,p90rsk,andthisfunctioncanbeblockbyD-Lys3-GHRP-6,200ng/mListhebestdose.ItrevealedthatGhrelinmainlycascadeactivateERK1,ERK2kinasethroughMAPKpathway,thenpromoingtheactivityofp90rsk,andtheactivatedp90rskcanbringthesignalintothenucleartostartaseriesofnucleartranscriptfactores.Ultimatelyrealizedthemechanismofpromotingearlyovineembryonicdevelopment.Inaddition,GhrelinrealizedthepromotefunctiononearlyovineembryodevelopmentbyadjustingtheexpressionofcellapoptosisgeneintowdirectionsinhibittheexpressionofBaxgeneandpromotetheexpressionofBcl-2gene.AnditcanbeantagonisticbyaddingD-Lys3-GHRP-6,orblocktheexpressionofGHS-R.NoexpressionofBcl-2mRNAinthegroupswhichhavenoexpressionofGHS-RmRNA.ItsuggestGhrelinhassignificantfunctionfortheexpressionofBcl-2mRNAattheearlyovineembryos.AnditfurtherprovedGhrelinhassignificantfunctionofanti-apoptosisonthedevelopmentofearlyovineembryos.
【作者】杨燕燕；
【导师】曹贵方；
【作者基本信息】内蒙古农业大学，基础兽医学，2014，博士
【关键词】ovine；embryos；MAPK；Ghrelin；Box；Bcl-2；

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